【求助】请教HRP逆行示踪技术

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HRP逆行示踪技术，资料上说TMB法最灵敏，可否指教TMB法步骤及试剂的配置，稳定剂钨酸钠的浓度是多少啊，感谢赐教！

一、 注射HRP， 固定， 切片：动物麻醉后在立体定位下用微玻管把30 HRP注入尾壳核。存活48小时后，经心脏插管，生理盐水50ml冲洗，用含1 多聚甲醛和2 戊二醛的0．1M PB (pH 7．3)灌注固定 取脑，于4℃下在上述固定液后固定4小时。取台黑质和束旁核的脑块用震动切片机切片，片厚6Oμm 。
二、成色反应和锇化步骤 ：切片经TMB—sT法成色后，用0．1M PB(pH<6．0)洗3— 6次，每次2— 3分钟；在后处理时，先用0．1M，pH 7．4的PB洗3O秒，然后浸入新配制成的DAB／Co＋＋／H 2O2。溶液(称50 mg DAB溶于48ml蒸
馏水后过滤，再加入0．2 M，pH 7．4的PB 50 ml，在搅拌下，滴加1％氯化故水溶液2 ml及30％ H2O2 30μ1)于37℃ 下温育1O分钟，温育毕用0．1 M，pH 7．4 PB洗1分钟X 3次，接着将切片移入另一干净的反应盘中再洗2分钟×3次， 以洗净切片表面残留的DAB．否则会影响锇化效果； 处理后的切片可于4℃下在0．1 M pH 7．4的PB中放置过夜或直接入1 锇酸(pH 7．4的0．1 MPB配制)于室温下锇化50分钟(避光)。
三、脱水和包埋：切片锇化后。用0．1 M pH 7．4的PB洗3分钟×3扶。TMB—SNF法成色的切片，按Carson和M esulam的步骤在梯度酒精(80 %、90% 95%，l 00％、l00％)快速脱水，每次7分钟。其它TMB法反应的切片在下述梯度酒精脱水：5O％ 、7O％ 各5分钟，9O%、95％、99％ 、l00％ ．100％备1O分钟。切片脱水后，入环氧丙烷(5分钟×2次)， 然后分别经1：1和1：3的环氧丙烷：Epon 812混合液浸透1小时和2小时，最后入纯包埋剂浸透2小时。浸透包埋剂的切片包埋在硅化的载玻片之间。。在60℃下聚合48小时。
四、取材、超薄切片和电镜观察：平板包埋后的切片。在解剖显微镜下切取含逆行标记细胞的部位(约1．5mm2 )，用502胶牯到空白包埋块上．修块后作超薄切片。将淡黄色或银白色的切片捞取到无膜的230目或300目铜网上。不染色或铅轻染(1— 2分钟)后，透射电镜观察。

谢谢楼上的帮助，不过我做的是坐骨神经HRP逆行示踪，切取脊髓腰膨大和相应神经节后，用TMB法怎么显色呢，我没有查到具体的步骤。或者在哪些资料上能够查到呢？