【求助】NBT实验后细胞结构受损，细胞破碎，怎么回事？？？

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一批细胞，同时做瑞氏吉姆萨染色和NBT，前者细胞结构完整，细胞圆且透亮、胞膜清晰，而NBT实验后细胞结构受损，细胞破碎，怎么回事？？？恳请做过NBT实验的前辈们多多指教！看看我的问题出在哪了？谢谢！
70%二甲基甲酰胺：7ml二甲基甲酰胺＋3ml双蒸水
NBT配制：0.5gNBT粉末溶于10ml70%二甲基甲酰胺，浓度为5%。用PBS稀释成0.1%，备用。
TPA配制：1ml DMSO 溶解1mg TPA，贮存液浓度：1mg/ml
用生理盐水稀释为工作液，浓度：600ng/100ul
步骤：
1.取各组细胞悬液，4度、1000rpm
、离心5min，弃上清，每管加入0.5mL的0.1%NBT溶液和20ulTPA溶液摇匀。
3. 37℃水浴60分钟，4度、1000rpm离心5min，弃上清，取少量细胞涂片，空气干燥。