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【求助】NBT实验后细胞结构受损,细胞破碎,怎么回事???

【求助】NBT实验后细胞结构受损,细胞破碎,怎么回事???-2010-07-16 01:32:24 AM

【求助】NBT实验后细胞结构受损,细胞破碎,怎么回事???

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一批细胞,同时做瑞氏吉姆萨染色和NBT,前者细胞结构完整,细胞圆且透亮、胞膜清晰,而NBT实验后细胞结构受损,细胞破碎,怎么回事???恳请做过NBT实验的前辈们多多指教!看看我的问题出在哪了?谢谢!
70%二甲基甲酰胺:7ml二甲基甲酰胺+3ml双蒸水
NBT配制:0.5gNBT粉末溶于10ml70%二甲基甲酰胺,浓度为5%。用PBS稀释成0.1%,备用。
TPA配制:1ml DMSO 溶解1mg TPA,贮存液浓度:1mg/ml
用生理盐水稀释为工作液,浓度:600ng/100ul
步骤:
1.取各组细胞悬液,4度、1000rpm
、离心5min,弃上清,每管加入0.5mL的0.1%NBT溶液和20ulTPA溶液摇匀。
3. 37℃水浴60分钟,4度、1000rpm离心5min,弃上清,取少量细胞涂片,空气干燥。

发表者QINQIN 时间 2010-07-16 01:32:24 AM

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