【求助】大家帮我看看这块胶吧？急死我了！！！

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不知道为什么胶跑成这样了，请大家帮我分析分析原因吧！

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样品有盐嘛?还是有强变性剂?

你的样品制的不干净，有点脏．再一个就是你一向转二向的时候有气泡．
　我想问你是用R-250还是G-250染色啊　你用的胶条的ph范围？

样品应该没有盐，在第一向的时候电压可以很轻松的升到8000，强变性剂都包括什么呢？我的破碎buffer里主要只有Tiis－Cl 和甘油啊。
还有马源说的样品不干净，那是什么污染呢？
我第一向转二向的时候确实有气泡，我觉得每次都有这个问题，不知道应该怎么避免？
我染色用的是胶体考染的方法

当把样品沉淀吸出来的时候，跑胶会出现你那种竖条。所以煮样后离心要重视，我一般是10,000转，5min。再有加样时一定不能吸上沉淀。

我还想问一下，从第一向转到第二向的时候，怎么样避免产生气泡？

可以在玻璃片中间加点缓冲液进去，记得要加满。或者胶条用滤纸吸干，玻璃板之间的水也要吸干，可是这样子胶条会因太干燥而不容易推进去，你自己试一下看看哪种方法适合你

“玻璃片中间加点缓冲液进去，记得要加满”
这是怎么做的？

看你的胶还是聚焦有问题,当然其他也有待改善.关于聚焦的问题,你一向8000聚焦下来时电流大概是多少?
关于转移的问题,你可以采取这样的方法:先往两块玻璃板之间加满电泳BUFFER,在转移前将其全倒掉,并尽量吸干.然后马上塞入胶条(要快,不然不容易塞入),在塞到一大半时加入预热的低熔点琼脂糖(注意加到胶条和PAGE胶之间的区域).这样应该可以帮你解决这个问题.
还有,请教2个问题:你的MARKER是怎么加的?还有,你的上样量是多少?
我为人人,人人为我!

我聚焦的时候8000时电流已经接近50uA了，聚焦了共97000Hr。
我的MARKER是点在滤纸片上加进去的，上样量是1.2mg。
我在第一向到第二向转移 的时候一般就是把压胶的水倒赶净，然后把胶条塞进去，再加入琼脂糖，在塞胶条和加琼脂糖的时候胶条和PAGE胶之间；胶条和玻璃板之间容易出现气泡。

你的条纹主要在酸性端，你考虑过核算没有？

在制备样品的过程中，我特意超声和用硫酸链霉素去过核酸，应该不会再有核酸的问题了吧。