【求助】羟基磷灰石纯化小鼠IgG的方法

我最近在纯化小鼠的lgG，我用的是羟基磷灰石商品柱，Ａ液选择的是１０mMＰＢ缓冲液，Ｂ液选择的是4００mMＰＢ缓冲液，效果不佳．请问缓冲液的选择是否有问题，该如何选择？在上样平衡时出现的峰值比较像目的蛋白．目的蛋白是不是只会在拉剃度时才能洗脱下来？

最好还是用蛋白Ａ琼脂糖凝胶纯化，如果你一定要用现在的填料，那你需要摸什么样浓度的缓冲液洗杂带，什么浓度洗目标蛋白，缓冲液本身应该没问题，目的蛋白理论上应该是在开始梯度后才会有，你需要用电泳来检测才知道．

chromatography:
万分感谢您的指导!实验室现只有该种填料.可能只能慢慢摸索了.还想请问一下摸索的思路?