【求助】请帮我看一下我的双向电泳问题在哪

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我刚刚开始涉足双向电泳，目前做的是污染物的生物降解，想要分析细菌在污染物诱导下与无诱导下的蛋白差异。是IEF胶，最初用的两性电解质是3-10（BIORAD的),但一向胶凝得并不好，胶缩大概有1-2cm。而且很奇怪的，跑出来的双向胶蛋白都集中在酸性端。因为怀疑是两性电解质的问题，我又借用了别的实验室的安玛西亚的两性电解质，是5-8的，一向胶凝得挺好的，跑的双向电泳图会好些，但是还是比较集中在酸性端。不知道问题在哪，恳请大家帮我分析一下，不胜感激啊！

（缩略图，点击图片链接看原图）

上面是两性电解质为3-10跑出来的电泳图，下面是5-8的。

（缩略图，点击图片链接看原图）

可能在蛋白的提取制备过程中存在问题，因为中性和碱性蛋白如此少，一般似乎不太可能。

但从5-8和3-10的结果来看，蛋白点跑的还是挺好的，特别是5-8的胶。因此也许你的蛋白质可能绝大部分为酸性蛋白。可继续选用4-6或5-6的胶条做做看。

建议查一下文献，看看你所做的菌株在文献中是否有相似结果。

典型的盐多

谢谢DIGE，我查了一下，和我这株菌同属的用的基本上是4-7的，因此我下一步准备试试看这个范围的两性电解质效果如何，谢谢你了！

2Der，能具体说说吗，这个样品的制备是直接加裂解液超声的，确实有可能是盐的关系，不过具体我不太懂。但是我之前有的样品用丙酮沉淀的，跑出来的效果和上面的差不多。谢谢你！