【求助】细胞高速12000rpm离心后再加细胞裂解液还能提的出蛋白么？

我要做磷酸化的WB，原代取细胞，然后用药物作用5分钟后就必须裂解细胞提胞浆蛋白（磷酸化是一个很迅速的过程，所以从加药到裂解的时间要短），但是我的细胞是悬浮的，需要弃上清后再加裂解液，但是如果按平常的速度1000rpm离心10分钟,这期间药物不还是在起作用么？所以我想高速离心（12000rpm5min)转死细胞让细胞停止代谢，然后弃上清加裂解液，不知这样是否可以？经过这样的高速离心细胞死亡后还能提出蛋白么？

我觉得高速可能使部分细胞壁甚至细胞器破碎，如果离心细胞的量很大，离心后加入裂解液能够提取出蛋白。

细胞壁甚至细胞器破碎对提蛋白有什么影响？我的细胞量可以达到10^7,这个量可以么？如果不能高速离心，那么应该采取什么办法呢？如果低速离心（1000rpm5min),在离心过程中药物是否还在对细胞起作用呢？如果还在起作用，我是不是可以加完药就离心？感觉好像没这么做的